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免疫組化染色操作步驟-上海信帆生物

更新時(shí)間:2016-06-29      瀏覽次數(shù):1525

免疫組化染色

S—P免疫組化染色試劑盒采用生物素標(biāo)記的第二抗體與鏈霉菌抗生物素蛋白連接的過(guò)氧化物酶及底物色素混合液來(lái)測(cè)定細(xì)胞和組織中的抗原。
S—P免疫組化染色步驟:
1) 石蠟切片脫蠟和水化后,用PBS(pH7.4)沖洗三次,每次3分鐘(3×3’)。
2) 根據(jù)每一種抗體的要求,對(duì)組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)。
3) 每張切片加1滴或50ul過(guò)氧化酶阻斷溶液(試劑A),以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性,室溫下孵育10分鐘。
4) PBS沖洗3×3’。
5) 甩去PBS液,每張切片加1滴或50ul的非免疫性動(dòng)物血清(試劑B),室溫下孵育10分鐘。
6) 甩去血清,每張切片加1滴或50ul的*抗體(用戶自選),室溫下孵育60分鐘或4℃過(guò)夜,建議參閱每種抗體的說(shuō)明書(shū)。
7) PBS沖洗3×5’。
8) 甩去PBS液,每張切片加1滴或50ul生物素標(biāo)記的第二抗體(試劑C),室溫下孵育10分鐘。
9) PBS沖洗3×3’。
10)甩去PBS液,每張切片加1滴或50ul鏈霉菌抗生物素-過(guò)氧化物酶溶液(試劑D),室溫下孵育10分鐘。
11)PBS沖洗3×3’。
12)甩去PBS液,每張切片加2滴或100ul新鮮配制的DAB或AEC溶液,顯微鏡下觀察3—10分鐘,陽(yáng)性顯色為棕色或紅色。
13)自來(lái)水沖洗,蘇木素復(fù)染,0.1%HCL分化,0.1%氨水或PBS沖洗返藍(lán)。
14)如果用DAB顯色,則切片經(jīng)過(guò)梯度酒精脫水干燥,(二甲苯透明),中性樹(shù)膠封固;如果用AEC顯色,則切片不能經(jīng)酒精脫水,而直接用水性封片劑封片。

上海信帆生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進(jìn)口ELISA試劑盒,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。
標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品:進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免檢測(cè)服務(wù):進(jìn)口放免檢測(cè)服務(wù),國(guó)產(chǎn)放免檢測(cè)服務(wù),進(jìn)口美國(guó)鳳凰等放免檢測(cè)服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù):放免代測(cè),WB實(shí)驗(yàn),免疫組化代測(cè),熒光定量PCR代測(cè),病理細(xì)胞染色代測(cè),生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等。

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